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商洛293t细胞来电洽谈 英瀚斯牛气冲天
2023-11-06 17:42  浏览:50
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2分钟前 商洛293t细胞来电洽谈 英瀚斯[英瀚斯2eefa30]内容:Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名:2-(2-甲氧ji-4-硝ji苯ji)-3-(4-硝ji苯ji)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,是一种类似于MTT的化合物,它在电子载体1-甲氧ji-5-甲ji吩嗪鎓硫酸二jia酯(1-Methoxy PMS)存在的情况下,被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(formazan)。细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅,对于同样的细胞,颜色的深浅与活xi胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。干细bao培养诱导分化干细bao是一类具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞,理论上具有无限分裂能力,在特定条件下,可分化成特定组织。

细胞培养中常见的污染及解决方法

原生动物污染

原生动物污染后,细胞培养基变得轻微浑浊。在显微镜下,大量的小点来回移动。虽然此时细胞仍能生长,但繁殖速度减慢,细胞生长状态不好,边缘不清,变得不透明。原生动物与细胞形成共生关系。骨吸收陷窝在共培养7天后开始出现,随着培养时间的延长,陷窝面积呈增加趋势。同时,原生动物与细胞竞争营养。这种共生现象非常普遍,但以细胞为主,因为原生动物的数量相对较少,因而对细胞的正常生长没有影响,只有当它们达到一定数量时,才终爆发成为循环。

解决方法:原生动物污染的原因有很多,如液体消毒问题、操作问题、环境问题等,如果细胞足够,果断丢弃被污染的细胞和复苏细胞。如果要保留,需要购买使用相关的灭菌试剂。

4. 各种细胞对冻存速度的要求也不一样;上皮细胞和成纤维细胞耐受性可能大些,-2~-3℃/ 分钟合适;胚胎细胞耐受性较小,不宜太快。总之在一开始时,下降速度不能超过-10℃/ 分钟。

5. 用什么防护剂合适和用量多大,要依细胞而定,初代培养细胞用 DMSO 较好,一般细胞可用甘油;用量以较小为好。有人认为肤上皮细胞贮存在 20%-30% 甘油中很好。

6. 原则上细胞在液氮中可贮存多年,但为妥善起见,冻存一年后,应再复苏培养一次,然后再继续冻存。

7. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免

8. 注意自身的安全,对于来自人源性或病毒的细胞株应特别小心。操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂例如 DMSO,并避免尖锐物品伤人等。

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