实验动物的抓取和固定
在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。
实验动物的标记
1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%(咖啡色)。
标记的原则是:先左后右,从上到下。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。
2. 挂牌法 常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记,只记录它们的外表特征和毛色即可。
3. 笼子编号 标记在笼子上。
以上只介绍了几种的方法,在使用中可灵活掌握。
shen综合征出l血热(HFRS)的动物模型怎么制备?
(1)繁殖方法:收集大约4周龄的沙鼠,并在感l染前1天,感l染后1天,2天和4天腹膜内施用30mg/kg体重。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠,C3H/He系经产雌鼠有80~的自发性。内部注she环磷酰胺的总剂量为120 mg/kg体重,该病毒在第0天被感l染。感l染的方法是固定沙鼠,在轻度麻l醉后用HFRS病毒细胞培养上清液接种大脑,并接种0.3 ml /头。
(2)模型的特征接种和感l染后,模型沙鼠通常在第8到12天患病,没有活动,嗜睡,闭眼,毛囊,卷曲,昏迷,后肢麻l痹,发病后一次?2d死l亡。动物模型的设计原则重复性理想的动物模型应该是可重复的,甚至是可以标准化的。冷冻切片和间接免l疫荧光技术可以检测脑,肺,脾,肝,肠,shen以及其他患病和死l亡的沙土鼠组织中的HFRS病毒抗原,无论采用何种感l染方法,导致全身感l染,尤其是脑和肺。当病毒被稀释到10 -8的功效时,它不会引起急性的感l染。
(3)比较医学shen综合征出l血热(HFRS)具有复杂的临床表现和特殊的病史。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵,用耳号钳刺上号码,然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。先前的研究表明,HFRS的病因与人体的免l疫病理学有关,具有明显的免l疫功能障碍。蒙古沙鼠是易受HFRS病毒感l染的实验动物,蒙古沙鼠HFRS感l染模型可用于大规模生产HFRS灭活疫l苗,HFRS临床病因和药l物治l疗。
Y迷宫主要应用于动物的辨别性学习,工作记忆及参考记忆的测试。外推法(Extrapolation)要冒风险,因为动物与人到底不是一种生物。Y迷宫由三个完全相同的臂组成。每个臂尽头有食物提供装置,根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。相对而言,Y迷宫简便、可行,相对八臂迷宫来说更加简单,有一定的实用性,现常用于学习记忆功能评价。
Y迷宫、八臂迷宫这类食物奖赏型迷宫任务能够检测啮齿类动物与海马和前额叶脑区相关的空间参考记忆和空间工作记忆。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、疾病和等方面的应用正日益增多。当动物在迷宫中寻找食物时,动物需要根据迷宫周围的视觉标示,记住它已搜寻过的迷宫臂,以避免重复进入同一个臂,从而有效地获得食物。这种类型的记忆能指导进行中的行为,被称为工作记忆。
Y迷宫实验模型用来研究啮齿类动物的空间识别记忆能力,这相对于被动回避等实验的优点在于:这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性,不需要动物学习任何规则来趋利避害,能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。